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Seis consideraciones que mejorarán sus resultados en HRGC

Zonas críticas de un HRGC
Zonas críticas de un HRGC

La selección de los accesorios y columna para GC resulta crítica para asegurar unas prestaciones óptimas de su instrumento.

Le proponemos analizar paso a paso qué accesorios son los más aconsejables para obtener los resultados esperados en función de la naturaleza de la muestra a analizar.

Consideraremos los puntos siguientes:

  • Viales
  • Jeringas
  • Membranas (septas)
  • Liner (Insertos de Inyector)
  • Conectores y Ferrulas
  • Columnas

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Interchim SPE 6.25ws su Autómata para EFS. Parte III.

Un caso Real

CabeceraEl Autómata SPE 6.25ws permite una programación muy fácil e intuitiva. Pero su utilidad se muestra en un caso real: determinación de Zolpidem en orina.

Veremos como con SPE 6.25ws frente al método tradicional mediante Extractor de Vacío (Vacuum Manifold) la recuperación aumenta (de 97% al 94%) la RSD disminuye (2.37% frente a 8.93%) y, sobre todo, el tiempo de ususario disminuye de unos 320′ a ¡sólo 8′!

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Determinación de la Concentración de mAb’s por Cromatografía de Afinidad (AC)

mAbsDurante el desarrollo de mAbs recombinantes, han de analizarse un gran número de muestras de cultivo de células (HCC)  para determinar la concentración de lgC, es decir, varios epítopos de anticuerpos deben ser cuantificados. El alto grado de especificidad ofrecido por la Cromatografía de Afinidad permite alternativas potentes a establecidos métodos por inmunoafinidad como ELISA. Sigue leyendo Determinación de la Concentración de mAb’s por Cromatografía de Afinidad (AC)

Análisis de Surfactantes y Emulsionantes por HPLC

PortadaLos surfactantes forman un grupo diverso de compuestos cuyas estructuras varían ampliamente pero que, generalmente, contienen una cadena de hidrocarburo lipófila y un grupo hidrofílico soluble en agua. Se pueden categorizar en base a su estructura e incluyen clases no iónicas, aniónicas y catiónicas. y se usan ampliamente como detergentes en champús y productos de limpieza, como agentes de par iónico en cromatografía y en dispersantes complejos usados para tratar vertidos de hidrocarburos. Sigue leyendo Análisis de Surfactantes y Emulsionantes por HPLC

Análisis de Antibióticos Aminoglucósídos con una Columna Especializada de Fase Inversa

PortadaLa columna Thermo Scientific™ Acclaim™ AmG C18 es una columna de Fase Inversa C18 basada en sílice especialmente diseñada para el análisis de Antibióticos Aminoglucósidos por Cromatografía de Fase Inversa y Par Iónico (IP-RPLC). Esta columna permite la determinación de la pureza, la caracterización y cuantificación de impurezas, el control terapéutico y residual en  varias matrices . Su química única permite una tolerancia inusual en condiciones de pH muy bajo, a alta temperatura y con fases móviles acuosas.

Acclaim™ AmG C18 permite:

  • Selectividad excelente para aminoglucósidos
  • Superior tolerancia a condiciones ácidas
  • Elevada eficacia y velocidad
  • Facilidad de uso

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Análisis de Variantes de Oxidación por Cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC)

mAbsLa Cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC) es una potente técnica para la separación de proteínas en condiciones suaves no denaturalizantes. Las biomoléculas se separan por su grado de hidrofobicidad y la fase móvil es un agente desalante que. a altas concentraciones, retiene la proteína al aumentar la interacción hidrofóbica entre proteínas y fase estacionaria. Sigue leyendo Análisis de Variantes de Oxidación por Cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC)

Análisis de mAB’s Intactos y Fragmentos de mAb’s por Cromatografía de Fase Inversa (RPC)

Glycan-2La presencia y relativa abundancia  de las diferentes glicoformas así como la determinación correcta de la secuencia de la proteína resulta imprescindibles para verificar las especificaciones o los requerimientos de calidad de la molécula completa  y asegurar que los efectos biológicos de la droga sean seguros y reproducibles. Sigue leyendo Análisis de mAB’s Intactos y Fragmentos de mAb’s por Cromatografía de Fase Inversa (RPC)

Análisis de Glicanos por Cromatografía de Modo Mixto (MMC) y Cromatografía de Interacción Hidrofílica (HILIC)

Glycan-2La glicosilación es una de las modificaciones post-translacionales (PTM’s) que más afectan al desarrollo de una proteína terapéutica. La mayoría de las proteínas candidatas en el desarrollo clínico y preclínico como las proteínas recombinantes y los anticuerpos monoclonales (mAb’s) son derivados glicosilados y su actividad biológica depende muchas veces de la estructura y tipo de los glicanos unidos a esas proteínas. Sigue leyendo Análisis de Glicanos por Cromatografía de Modo Mixto (MMC) y Cromatografía de Interacción Hidrofílica (HILIC)

Separación de Agregados por Cromatografía de Exclusión (SEC)

mAbsLos mAbs producidos por cultivos celulares de mamíferos pueden contener cantidades significativas de dímeros y agregados de mayor orden. Los estudios muestran que esos agregados presentes en drogas pueden inducir una respuesta superior pero pueden también causar severas reacciones inmunogéncas y anafilácticas. Sigue leyendo Separación de Agregados por Cromatografía de Exclusión (SEC)

Análisis de Conjugados Anticuerpo-Droga (ADC) por Cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC) y de Fase Inversa (RP)

mAbsLos ADCs han generado un tremendo interés entre las compañías farmacéuticas debido a su mayor eficacia clínica sobre los anticuerpos monoclonales nativos. La conjugación con drogas a menudo resulta en una molécula ADC que es heterogénea tanto frente a la distribución como a la  carga de drogas citotóxicas en el mAb.  Se ha demostrado que la cantidad de droga unida al mAb afecta directamente a la seguridad y eficacia de la droga. Por lo tanto resulta crítico caracterizar y controlar completamente la heterogeneidad de los ADCs durante el desarrollo y producción. La cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC) y la Cromatografía de Fase Inversa (RPC) resultan adecuadas en la separación de ADCs puesto que la unión de drogas tóxicas altera la hidrofobicidad del anticuerpo. En general el anticuerpo no conjugado menos hidrofóbico eluye antes y a medida que el número de drogas unidas aumenta el tiempo de retención aumenta también. Sigue leyendo Análisis de Conjugados Anticuerpo-Droga (ADC) por Cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC) y de Fase Inversa (RP)