Nuevas Columnas FLASH Monolíticas para Péptidos de Interchim®

Introducción

Monolitos Flash SEM

Las Columnas Monolito para Péptidos Interchim® Peptides  es una columna preempacada con un nuevo gel de sílice para Cromatografía de Fase Inversa que permite una alta velocidad con sólo una contra-presión moderada o baja.

La clara estructura de los poros del monolito Interchim® Peptides  permite una perfusión más rápida y profunda del solvente en las partículas permitiendo una purificación más efectiva, especialmente de macromoléculas como péptidos, proteínas y ácidos nucleicos, con una presión extremadamente baja (para saber más sobre perfusión en columnas monolíticas vea la entrada http://blog.cromlab.es/accucore-la-nueva-fase-pelicular-de-termo-scientific-tecnologicamente-superior/).

  • Alta Pureza y Baja Presión
  • Alta Velocidad
  • Mejor resolución que fases convencionales de 15μm con sólo 1/4 de la contra-presión.
Fabricación Controlada sin Grietas y con Distribución de Poro Estrecha

Monolito Diametro medio Poro

Monolito Estandar

Ventajas
# Alta Resolución & Alto Rendimiento
La Columna Interchim® Peptides Monolith demuestra una alta capacidad de separación para un amplio rango de moléculas. Especialmente en modo gradiente. ,
La Columna Interchim® Peptides Monolith con un diámetro de partícula de  30μm muestra una resolución equivalente o mejor que la ofrecida por una fase convencional esférica  de 15μm.
Monolito Fase Reversa
  • Efectiva tanto para moléculas pequeñas o grandes  en métodos con gradiente.
  • Fácil escalado hasta el tamaño del Lote
# Velocidad Ultra Alta
La Columna Interchim® Peptides Monolith resulta realmente excelente en respuesta a una condición de gradiente y muestra una velocidad excelente a un caudal muy alto.  Al aumentar el caudal hasta la presión límite del sistema el tiempo de proceso de la purificación puede acortarse correspondientemente.
Monolito Velocidad
  • Reducción de ~80% del tiempo de purificación
# Fácil Escalado con Columnas y Cargas Mayores
La Columna Interchim® Peptides Monolith puede resolver el dilema de renunciar a una purificación de alta resolución por una columna de mayor capacidad debido al límite de presión.
La característica de un perfil de contra-presión extremadamente baja facilita aumentar el tamaño de la columna para aumentar la capacidad de carga y lograr alta resolución y alto rendimiento.
Monolito Capacidad Cargar
# Purificación Verde & Eco: 2-Propanol como eluyente
Gracias a perfil muy bajo de contra-presión, Interchim® Peptides Monolith puede conseguir purificaciones de Fase Reversa con
2-propanol sin renunciar a la alta resolución.
Procesos Verdes y ECO libres de solventes tóxicos como acetonitrilo y  metanol son ahora una realidad.
Monolito IPA
  • Sin Acetonitrilo & Metanol
  • Sin Solventes Tóxicos
# ¡Prestaciones Mejoradas con cualquier sistema!
Incluso en purificación de Fase Reversa, la presión en columna Interchim® Peptides Monolith es tan baja como 2 bar o menos, a un caudal estándar y se puede adaptar a cualquier equipo de presión media / baja como puriFlash® o a bombas de jeringa. Además, es bastante fácil mejorar el rendimiento de la separación al apilar 2 o más columnas.
Por lo tanto, será posible no sólo poner columnas en serie, pero también trabajar a un mayor caudal que el óptimo, cosa no posible con sílice convencional.
Los ejemplos que siguen contienen la mezcla siguiente:
1- GLY-TYR 238
2- VAL-TYR-VAL 380
3- Met-Enkephalin 574
4- Angiotensin 1 000
5- Cytochrome c from bovine heart 11749
Método:
Solvente A : Agua + 0.1%TFA 
Solvente B : ACN + 0.1%TFA
A. Columna Única
Monolito y Normal Fase Reversa
Gradiente : 5 to 40% d’ACN in 33 :45
Caudal : 15 mL/min
Presión : 4 bar (monolito)
Presión : 7 bar (PF-15C18N-F0025)
En esta  aplicación, las dos columnas ofrecen un resultado similar. Los compuestos 3 y 4 coeluyen.
B. Dos Columnas en Serie
Monolito y Normal Fase Reversa 2

Gradiente : 5 to 40% d’ACN in 66 :30
Caudal : 15 mL/min
Presión : 4 bar (monolito)
Presión : 13 bar (PF-15C18N-F0025)

Al poner dos columnas en serie para separar los compuestos 3 y 4 se dobla el tiempo de análisis ¡superando los 60 minutos!

 C. Dos Columnas en Serie y Aumento de Caudal
Monolito y Normal Fase Reversa 3

Gradiente : 5 to 40% d’ACN in 66 :30
Caudal : 60 mL/min
Presión : 17 bar (monolito)
Presión : Superó el límite (PF-15C18N-F0025)

Al aumentar el caudal, aun ligeramente, la columna PF-15C18N-F0025 genera demasiada presión por lo que no es posible reducir de manera significativa el tiempo de análisis. .
Al contrario, la columna monolito permite aumentar el caudal hasta  to 60mL / min (4 veces el caudal óptimo) y permite un tiempo de purificación de 16min.
  • Aplicable también con sistemas de bombeo de baja presión para unas mejores prestaciones
# ¡Escala Preparativa a baja presión!
El perfil de presión extremadamente bajo de las columnas  Interchim® Peptides Monolith  permite un escalado muy fácil de semi-preparativo o preparativo sin preocuparse por el límite de presión. Se ha demostrado en planta de producción con una columna de 150mm de diámetro en la purificación de un péptido activo
(sobre 4kDa), que contiene muchas impurezas de difícil solución.

Monolito y Normal Fase Reversa 4

¿Por qué elegir columnas Monolito?

Como los diferentes resultados muestran, el uso de columnas puriFlash® monolith le ayudará en:

  • Ahorrar hasta un 80%  de tiempo de trabajo en su purificación e incrementar su productividad.
  • Usar columnas con tamaño de partícula de  30 μm y obtener resultados al menos equivalentes a columnas de 15 μm.
  • Eliminar solventes tóxicos como acetonitrilo o metanol o usar solventes que generan más contra-presión como el  isopropanol.
  • Usar columnas de partícula pequeña en sistemas de baja presión para unas prestaciones superiores.