Un caso Real
El Autómata SPE 6.25ws permite una programación muy fácil e intuitiva. Pero su utilidad se muestra en un caso real: determinación de Zolpidem en orina.
Veremos como con SPE 6.25ws frente al método tradicional mediante Extractor de Vacío (Vacuum Manifold) la recuperación aumenta (de 97% al 94%) la RSD disminuye (2.37% frente a 8.93%) y, sobre todo, el tiempo de ususario disminuye de unos 320′ a ¡sólo 8′!
¿Qué es el Zolpidem?
El Zolpidem (N,N,6-trimetil-2-(4-metilfenil)- imidazo(1,2-a)piridin-3-acetamida), es un fármaco usado en el control de trastornos del sueño.
Metodología
Como es un fármaco que puede administrarse bajo control, se ha utilizado una metodología existente(1) con muestras reales para valorar las ventajes de un sistema EFS automático como SPE 6.25ws frente al método tradicional con extractor de vacío.
Debido a la naturaleza polar de la molécula el tubo de extracción contiene una Fase Mixta MM1 (Fase Inversa e Intercambio Catiónico Fuerte) y el procedimiento es relativamente complejo.
Etapas del procedimiento con EFS tradicional y con SPE 6.25ws
Para evaluar los resultados el Paso de Extracción se ha dividido en dos partes:
- 20x1mL de muestras de orina fortificadas con 100 ng/mL de Zolpidem (Procedimiento con SPE 6.25ws)
- 20x1mL de muestras de orina fortificadas con 100 ng/mL de Zolpidem (Procedimiento con Extractor de vacío)
Cada muestra se sometió al siguiente procedimiento:
- A cada muestra se añadió 1 mL de ácido acético 0.1 M
- Extracción de las muestras
- Secado de las muestras bajo gas inerte
- Reconstitución en 1 mL of Agua
- Análisis de las muestras
Con el sistema de extracción tradicional se constataron los problemas típicos de la técnica con Extractor de Vacío (Vacuum Manifold):
- Control pobre del caudal
- Precisión baja en las adiciones de muestra y solvente
- Tiempo empleado excesivo
Para ambas metodologías de extracción se siguieron las mismas etapas:
Resultados Analíticos
Se muestran a continuación cromatograma, recta de calibrado y los 20 cromatogramas superpuestos obtenidos con SPE 6.25ws.
La reproducibilidad del instrumento se ha calculado tras 15 inyecciones repetidas de estándar y su RSD es del 2.01%.
Conclusiones
- Ahorro de tiempo de operador y menos errores humanos
- Superior reproducibilidad
- Sin contaminación cruzada entre muestras (Limpieza Automática de la Aguja del Autoinyector. Bajo Volumen Muerto)
- Perfectamente adaptable para Desarrollo de Métodos y Análisis de rutina.
- Flexible (columnas de 1-3-6 ml en la misma secuencia).
- Software intuitivo, con amplias posibilidades operativas.
Bibliografía
(1) Journal of Analytical Toxicology. 2014;38:512-518