La Cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC) es una potente técnica para la separación de proteínas en condiciones suaves no denaturalizantes. Las biomoléculas se separan por su grado de hidrofobicidad y la fase móvil es un agente desalante que. a altas concentraciones, retiene la proteína al aumentar la interacción hidrofóbica entre proteínas y fase estacionaria. Sigue leyendo Análisis de Variantes de Oxidación por Cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC)
Archivos de la categoría BIOCROMATOGRAFÍA
Análisis de mAB’s Intactos y Fragmentos de mAb’s por Cromatografía de Fase Inversa (RPC)
La presencia y relativa abundancia de las diferentes glicoformas así como la determinación correcta de la secuencia de la proteína resulta imprescindibles para verificar las especificaciones o los requerimientos de calidad de la molécula completa y asegurar que los efectos biológicos de la droga sean seguros y reproducibles. Sigue leyendo Análisis de mAB’s Intactos y Fragmentos de mAb’s por Cromatografía de Fase Inversa (RPC)
Mapa de Péptidos por Cromatografía de Fase Inversa (RPC)
La Cromatografía de Fase Inversa (RPC) de péptidos permite a la industria biofarmacéutica obtener información sobre la naturaleza y calidad de las proteínas terapéuticas. La Cromatografía de Fase Inversa en combinación con detección UV es de uso común en estudios de estabilidad, control de procesos, control de calidad y otros casos en los que los atributos importantes de la secuencia de péptidos se extrapolan directamente del cromatograma. Sigue leyendo Mapa de Péptidos por Cromatografía de Fase Inversa (RPC)
Análisis de Glicanos por Cromatografía de Modo Mixto (MMC) y Cromatografía de Interacción Hidrofílica (HILIC)
La glicosilación es una de las modificaciones post-translacionales (PTM’s) que más afectan al desarrollo de una proteína terapéutica. La mayoría de las proteínas candidatas en el desarrollo clínico y preclínico como las proteínas recombinantes y los anticuerpos monoclonales (mAb’s) son derivados glicosilados y su actividad biológica depende muchas veces de la estructura y tipo de los glicanos unidos a esas proteínas. Sigue leyendo Análisis de Glicanos por Cromatografía de Modo Mixto (MMC) y Cromatografía de Interacción Hidrofílica (HILIC)
Separación de Agregados por Cromatografía de Exclusión (SEC)
Los mAbs producidos por cultivos celulares de mamíferos pueden contener cantidades significativas de dímeros y agregados de mayor orden. Los estudios muestran que esos agregados presentes en drogas pueden inducir una respuesta superior pero pueden también causar severas reacciones inmunogéncas y anafilácticas. Sigue leyendo Separación de Agregados por Cromatografía de Exclusión (SEC)
Análisis de Conjugados Anticuerpo-Droga (ADC) por Cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC) y de Fase Inversa (RP)
Los ADCs han generado un tremendo interés entre las compañías farmacéuticas debido a su mayor eficacia clínica sobre los anticuerpos monoclonales nativos. La conjugación con drogas a menudo resulta en una molécula ADC que es heterogénea tanto frente a la distribución como a la carga de drogas citotóxicas en el mAb. Se ha demostrado que la cantidad de droga unida al mAb afecta directamente a la seguridad y eficacia de la droga. Por lo tanto resulta crítico caracterizar y controlar completamente la heterogeneidad de los ADCs durante el desarrollo y producción. La cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC) y la Cromatografía de Fase Inversa (RPC) resultan adecuadas en la separación de ADCs puesto que la unión de drogas tóxicas altera la hidrofobicidad del anticuerpo. En general el anticuerpo no conjugado menos hidrofóbico eluye antes y a medida que el número de drogas unidas aumenta el tiempo de retención aumenta también. Sigue leyendo Análisis de Conjugados Anticuerpo-Droga (ADC) por Cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC) y de Fase Inversa (RP)
Nuevas Columnas de Interacción Hidrofóbica (HIC)
La familia de columnas Thermo Scientific™ MAbPac™ HIC ha sido diseñada para la separación de Anticuerpos Monoclonales (mAbs) y productos relacionados mediante Cromatografía de Interacción Hidrofóbica (HIC). La química unica de estas columnas permite una elevada resolución, biocompatibilidad excelente y una selectividad complementaria adecuada para un amplio rango de ensayos de mABs y substancias relacionadas. Sigue leyendo Nuevas Columnas de Interacción Hidrofóbica (HIC)
SMART DIGEST: Facilitando la digestión perfecta
Los kits de digestión Thermo Scientific™ SMART Digest™ con su diseño basado en tripsina inmovilizada térmicamente estable, permiten aplicaciones biofarmacéuticas y proteómicas que requieran análisis rápidos, muy reproducibles y de alta sensibilidad, especialmente en flujos de trabajo de alto rendimiento. Sigue leyendo SMART DIGEST: Facilitando la digestión perfecta